Пцр гепатита с в инвитро

№324ПЛ Вирус гепатита С, определение РНК, генотипирование, (HCV-RNA, genotyping) в плазме крови

Определение генотипа вируса гепатита С методом ПЦР.

Аналитические показатели. Выявление РНК вируса гепатита С (hepatitis С virus) методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) и определение его генотипа в сыворотке крови. Определяемый фрагмент — консервативный участок генома вируса, свойственный конкретному генотипу. Специфичность определения — 98%. Вирус гепатита С отличается высокой изменчивостью и наличием нескольких вариантов генотипа. Для клинической практики достаточно разграничивать 4 субтипа ВГС: 1a, 1b, 2, 3. На территории РФ преобладающим генотипом является 1b, далее с убывающей частотой — 3, 1a, 2.

Достоверным прогностическим фактором развития инфекции ВГС и ответа на противовирусную терапию является генотип вируса гепатита С. Генотипом вируса также определяется продолжительность курса лечения, что весьма актуально учитывая широкий спектр побочных действий интерферона и низкую переносимость этого препарата больными.

  • Положительный качественный тест на наличие РНК вируса гепатита С в сыворотке крови.
  • Определение тактики лечения пациентов.
  • Точная оценка эффективности лечения.
  • Прогноз хронизации инфекционного процесса.
  • Определение прогрессирования заболевания.

Интерпретация результатов исследования содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

В Независимой лаборатории ИНВИТРО для проведения исследования используется тест-система НПФ «ДНК-Технология». Исследование включает в себя определение вируса гепатита С качественное, определение генотипов 1а, 1b, 2, 3 качественное.

В случае присутствия у пациента вируса с иным генотипом выдаётся ответ: «Не типируется. Исследовались генотипы 1а, 1b, 2, 3».

Интерпретация результатов

У пациентов с субтипом 1b хронизация HCV-инфекции происходит в 90% случаев, в то время как с генотипами 2 и 3 в 33 — 50%; инфицирование генотипом 1b сопровождается более тяжёлым течением заболевания, развитием цирроза печени и гепатоцеллюлярной карциномы, пациенты с типом 3 имеют более выраженный стеатоз и поражения желчевыводящих путей, а также более высокий уровень АлАТ, чем пациенты с HCV генотипа 1b. При этом уровень фиброза более выражен у пациентов с вирусом субтипа 1b.

При монотерапии интерфероном устойчивый ответ наблюдается у 18% пациентов, инфицированных HCV субтипа 1b, и у 55% — инфицированных другими генотипами, при комбинированной схеме лечения интерферон+рибаверин стойкий ответ наблюдается у 28% пациентов, инфицированных HCV субтипа 1b и у 66% пациентов, инфицированных другими генотипами.

№350 Вирус гепатита С, определение РНК (количественное)

Вирусный гепатит С (HCV) – инфекционная болезнь, которая поражает печень. Инфицирование происходит через кровь.

Данный вирус имеет способность мутировать, и это дает ему возможность ускользать от иммунной системы, что затрудняет лечение. На самом деле, вирус гепатита С представляет собой спектр подобных вирусов, они выделяются в отдельные подгруппы, которые квалифицируются по субтипам и генотипам.

Для выявления возбудителя HCV применяется анализ рнк вируса гепатита C, в ходе которого методом ПЦР (полимерной цепной реакции) в реальном времени определяют наличие РНК (генетического материала) вируса, его количество, то есть вирусную нагрузку в образце крови.

Существуют следующие виды тестов крови на определение рнк гепатита C:

Количественный тест

Количественный анализ на гепатит С определяет концентрацию вируса в крови. РНК гепатит С количественно проверяет степень инфекционности заболевания. При повышении концентрации гепатита в крови возрастает риск заразить другого человека. Кроме того, высокое содержание вируса уменьшает эффект лечения.

ПЦР количественный на гепатит С важен для контроля эффективности терапии, расшифровка анализа имеет прогностическое значение, позволяющее определять хронизацию гепатита В. В большинстве случаев ПЦР С-гепатита делают сразу же после обнаружения соответствующих антител. Далее тесты проводят на четвертую, двенадцатую, двадцать четвертую недели. Потом – раз в год.

Качественный тест

РНК вируса гепатита С качественное исследование должны проходить все пациенты с антителами С-гепатита. Результат анализа дает два ответа – обнаружен вирус или нет. Референсное значение, то есть норма, — это отрицательный показатель. По положительному результату судят об активном размножении данного вируса, заражающего здоровые клетки печени.

Беременность и гепатит С

Гепатит С не может быть противопоказанием к беременности, хотя передача вируса плоду возможна. Риск такого заражения не зависит от времени инфицирования матери. В течение беременности женщинам трижды проводится обследование на HCV. Часто инфекция протекает бессимптомно и не влияет на исход беременности и родов.

Читать еще:  Назначения при цистите мочевого пузыря

Лаборатория ИНВИТРО предлагает вам провести все необходимые исследования. Материалом для сдачи данного анализа является венозная кровь (более информативный материал для исследования – биопсия печени). Взятие крови производится натощак. У нас приемлемые цены и всегда качественное выполнение работы.

  • Положительный качественный тест на наличие РНК вируса гепатита С в сыворотке крови.
  • Определение тактики лечения пациентов.
  • Точная оценка эффективности лечения.

Референсные значения: в норме — «не обнаружено».
Единицы измерения в лаборатории ИНВИТРО: количество выявленной РНК вируса гепатита C, выраженная в МЕ/мл.
Перевод единиц: 1 IU/ml x 2,7 = copies/ml.

Интерпретация результата:

  • «не обнаружено» — HСV РНК не обнаружена;
  • «менее 600 МЕ/мл» — HСV РНК обнаружена, ниже чем 600 HСV IU/мл;
  • «более 700000 МЕ/мл» — HСV РНК обнаружена, более чем 700000 HСV IU/мл.

Количественное определение РНК вируса гепатита С методом ПЦР [вирусная нагрузка] (HCV Viral Load, Hepatitis C Virus RNA (Quantitative test)) в сыворотке крови

Определение РНК вируса гепатита С в сыворотке крови методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме «реального времени».

определяемый фрагмент – специфический участок РНК вируса гепатита С; специфичность определения — 100%. Чувствительность определения — 60 МЕ/мл Линейный диапазон: 10^2 — 1х10^8 МЕ/мл.

  • Положительный качественный тест на наличие РНК вируса гепатита С в сыворотке крови.
  • Определение вирусной нагрузки.
  • Определение тактики лечения пациентов.
  • Точная оценка эффективности лечения.

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Единицы измерения: количество РНК вируса гепатита C, выраженное в МЕ/мл. Для пересчета в копии/мл следует применять соотношение 1 МЕ=2,5 копии РНК вируса гепатита С. Интерпретация результата:

  • «не обнаружено»: РНК вируса гепатита С не выявлена или значение ниже предела чувствительности метода (60 МЕ/мл). Результат интерпретируют как «РНК вируса гепатита С не выявлена»;
  • 10^8 МЕ/мл: результат положительный с концентрацией РНК вируса гепатита С более 10^8 МЕ/мл.

Обращаем внимание, что сроки выполнения ПЦР-исследований могут быть увеличены при проведении подтверждающих тестов.

Вирус гепатита С (ВГС), РНК,качественный формат, ультрачувствительный тест (Hepatitis C Virus (HCV) RNA, qualitative, ultrasensitive)

Литература

  • Рекомендации по диагностике и лечению взрослых больных гепатитом С. МЗ РФ, 2014.
  • EASL (European Association for the Study of the Liver . Clinical Practice Guidelines. Diagnosis of acute and chronic hepatitis C. Goals and endpoints of HCV therapy.
  • http://www.easl.eu/research/our-contributions/clinical-practice-guidelines/detail/management-of-hepatitis-c-virus-infection-revised-version/report/4
  • Материалы фирмы-производителя реагентов.
  • В диагностических целях при выявлении антител к вирусу гепатита С в скрининговом тесте.
  • Для подтверждения устойчивого вирусологического ответа по окончании терапии хронического гепатита С.
  • В дополнение к исследованию антител для скрининга гепатита С пациентам с приобретенным иммунодефицитом либо получающим иммуносупрессивную терапию (лимфопролиферативные опухоли, пациенты, получающие лучевую или химиотерапию по поводу онкологических заболеваний, системную терапию глюкокортикостероидами при аллергических или аутоиммунных заболеваний, программный гемодиализ и др.).
  • Пациенты с заболеваниями печени неустановленной этиологии.

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Анализы крови на гепатит: подготовка к сдаче и расшифровка результатов

Гепатиты представляют собой серьезные заболевания, которые при неблагоприятном стечении обстоятельств могут приводить к раку печени, циррозу или печеночной недостаточности. В основе патологии лежат воспалительные процессы, обусловленные инфекционными или токсическими поражениями печени. Распространению гепатитов в обществе способствуют наркомания, алкоголизм, беспорядочные половые связи и низкое качество медицинских услуг.

Ключевым фактором в успешном лечении заболевания является его ранняя и точная диагностика при помощи лабораторных исследований крови. Рассмотрим основные виды анализов, которые необходимо сдать, чтобы подтвердить или опровергнуть наличие гепатита.

Какой анализ сдать? Маркёры вирусных гепатитов

Анализ может сдать любой желающий. Также пройти обследование рекомендуется лицам, у которых наблюдаются желтушность, изменение цвета экскрементов, слабость, тошнота, утрата аппетита, лихорадочные состояния, суставно-мышечные боли, тяжесть в правом подреберье. Если клинические симптомы вирусного гепатита отсутствуют, основанием для анализов являются повышенные концентрации внутриклеточных ферментов АсАт и АлАт, холестаз (уменьшение выделения желчи в двенадцатиперстную кишку) и контактирование с инфицированными гражданами. Обязательно сдавать кровь должны сотрудники медицинских учреждений, больные, которым предстоят операции, доноры крови и беременные женщины.

Гепатит A (болезнь Боткина) передается через жидкости организма, продукты питания, воду и предметы быта. Патология может протекать в острой, подострой и субклинической (бессимптомной) формах. Она считается самой доброкачественной из всех форм инфекции и практически не вызывает хронических поражений печени. Смертность составляет менее 0,4%. Чаще всего симптомы патологии исчезают за 2 недели, а период восстановления функций печени не превышает 1,5 месяцев. Заболеваемость в странах СНГ составляет 20–50 человек на 100 000 населения.

Читать еще:  Осложнения после прививки гепатита у детей

Для диагностики проводятся следующие качественные методы исследования сыворотки крови:

  • определение специфичных участков РНК вируса в крови методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени – обеспечивает 100% точность результата;
  • иммуноглобулины класса М–IgM обнаруживаются при первых клинических симптомах и далее 90–180 дней вплоть до полного выздоровления;
  • антитела класса G–IgG начинают вырабатываться во время болезни и остаются в организме навсегда. Исследование сыворотки крови на данные маркёры гепатита А может проводиться в целях контроля проведенной вакцинации, поскольку эти антитела показывают наличие иммунитета к заболеванию.

Гепатит B вызывается вирусом Hepadnaviridae, передается половым путем или через кровь. Протекает в острой и хронической формах. Он приводит к значительному поражению печени, а нередко – к циррозу или раку. В данный момент около 300 млн людей на планете являются носителями этой инфекции. Для уточнения диагноза следует сделать такие тесты:

  • качественные или количественные анализы на антиген HBsAg, а также антитела Anti-HBc IgG, которые есть у больных, выздоровевших лиц и здоровых носителей. Содержание HBsAg в плазме крови у здорового человека не превышает 0,05 МЕ/мл;
  • качественные тесты на белок HBeAg и антитела Anti-HBc IgM, свидетельствующие об остром течении болезни;
  • определение ДНК вируса методом ПЦР в режиме реального времени.

Гепатит C считается самым распространенным и наиболее опасным среди всех разновидностей заболевания. Часто он протекает бессимптомно на начальных стадиях и обнаруживается только при появлении таких серьезных осложнений, как цирроз или карцинома. Вирус передается преимущественно через жидкости организма и плохо поддается лечению. Его носителями в настоящее время считаются 500 млн людей.

Положительный анализ на гепатит С предполагает наличие соответствующего РНК-вируса в крови больного. Присутствие Anti-HCV и HCV IgG в организме, выявляемое качественными методами тестирования, говорит об острой стадии болезни. Количественные методы определения РНК методом ПЦР используются для оценки результативности терапии. Для генотипирования вируса и выбора тактики лечения необходимо исследование на интерлейкин-28-бета. Для проверки скрининговых анализов при положительном результате используется тест на антитела – рекомбинантный иммуноблот для выявления IgG-антител к различным антигенам вируса гепатита С.

Гепатиты D, G . Активность вируса гепатита D зависит от наличия в организме вируса типа B. Заболевание протекает очень тяжело. Если заражение двумя типами вируса происходит одновременно, то у больного диагностируется патология в острой стадии, если же дельта-вирус (гепатит D) развивается на фоне уже имеющейся печеночной инфекции, то отмечается обострение заболевания. Гепатит G предположительно активизируется при наличии других типов инфекции, сам же он не вызывает активную форму болезни.

Лабораторное тестирование предусматривает выявление РНК-цепочек вирусов, а также выявление антител класса IgM, позволяющих отличить острую форму заболевания от хронической. Эти исследования являются качественными.

Гепатит E по своему течению имеет сходство с вирусом типа А. Он передается через жидкости организма, сопровождается выраженным болевым синдромом и может принимать молниеносные формы. Эта патология особенно опасна для беременных женщин. У них болезнь может осложниться острой печеночной недостаточностью и энцефалопатией. В 20–30% случаев заболевание заканчивается смертью беременной. Если при лабораторном тестировании у пациента обнаруживаются антитела класса IgG и IgM, то это свидетельствует о патологии в острой стадии.

Подготовка к сдаче анализа и процедура забора крови

Биоматериал необходимо сдавать строго натощак. Также в течение суток перед посещением лаборатории следует воздерживаться от употребления жирной пищи и алкоголя. Результаты качественных тестов в большинстве случаев готовы уже через четыре часа после забора крови. На проведение количественного исследования может уйти до одного рабочего дня, не считая дня сдачи анализов.

Расшифровка результатов анализов на гепатит

Особенности расшифровки ответов зависят от типа исследования. Качественный тест позволяет установить факт наличия или отсутствия инфекции, а количественный дает возможность определить конкретную концентрацию исследуемого вещества. В некоторых случаях позитивным знаком является полное отсутствие антигена или белка, а в некоторых – содержание вещества в количестве ниже установленного уровня.

«Отрицательный» результат

Формулировка «анализ на гепатит – отрицательный» в бланке анализа свидетельствует об отсутствии заболевания. Подобный результат можно получить при прохождении качественного исследования методом ПЦР, объектом которого является РНК- или ДНК-цепочка вируса. Отрицательный ответ при проведении количественного иммунологического анализа говорит об отсутствии положительной реакции на наличие антигенов соответствующего типа. Но иногда при серологических (иммунологических) исследованиях в бланке анализов пишут величину ниже определенного значения, и в таком случае результат количественного теста считают отрицательным. Например, для вируса гепатита B пороговый уровень содержания антигена HBsAg в сыворотки крови составляет 0,05 МЕ/мл (единиц на миллилитр), когда показатель ниже – результат отрицательный, выше – положительный. На самом деле концентрацию ниже 0,05 МЕ/мл оборудование просто не может обнаружить, но, если де факто HBsAg присутствует в сыворотке крови в сколь угодно малом количестве – это означает инфицирование. Нормой является полное отсутствие как ДНК- или РНК-цепочек вирусов, так и их антигенов в биоматериале. А вот наличие антител к антигенам при отсутствии последних свидетельствует о том, что у вас выработан иммунный ответ на определенный вирус, либо вы переболели вирусным гепатитом ранее или прошли вакцинацию.

Читать еще:  Кровь из носа при циррозе печени

Анализ на гепатит «положительный»

Если результаты оказались положительными, то пациенту рекомендуется повторно пройти обследование, так как в некоторых случаях ложноположительный ответ может объясняться нарушением техники проведения тестирования, некачественными реактивами, неправильной подготовкой к процедуре (проведением теста после приема пищи), чувствительностью и специфичностью метода исследования, точностью анализаторов. Позитивный результат также может наблюдаться у человека, который некоторое время назад переболел острой формой вируса или является его здоровым носителем.

Согласно постановлениям Главного государственного санврача РФ от 22.10.2013 г. № 58 и от 28.02.2008 г. № 14, а также приказу Управления Роспотребнадзора по г. Москве от 01.10.2008 г. № 122 сведения о положительных результатах исследований на маркёры вирусных гепатитов передаются в ОРУИБ центров Госсанэпиднадзора.

Для того чтобы пройти обследование, нужно предъявить сотруднику диагностической лаборатории паспорт или документ, заменяющий его. Документ должен содержать информацию об адресе регистрации больного, а также его фотографию. При желании пациент может пройти тестирование анонимно, но подобные результаты не принимаются для оказания медпомощи.

При получении положительного ответа больной должен обратиться к врачу-инфекционисту, который назначит дополнительные исследования с целью подтверждения диагноза. Во время терапии тестирование может проводиться раз в 3 дня с целью отслеживания динамики состояния больного и эффективности лечения. При хроническом гепатите анализы сдаются каждые 6 месяцев с целью контроля состояния пациента.

Полное излечение возможно при своевременном проведении и правильно выбранной тактике терапии. Эффективность лечения зависит от конкретной инфекции, стадии болезни и общего состояния больного. Необходимость госпитализации определяется индивидуального для каждого пациента, в зависимости от тяжести его состояния. После выздоровления у человека сохраняются антитела, обеспечивающие ему пожизненный иммунитет либо устойчивый иммунный ответ на несколько лет, что зависит от многих факторов: возраста, индивидуальных особенностей организма и других.

Может ли анализ на гепатит быть ошибочным?

Ошибочные результаты нередко фиксируются при использовании некачественных реактивов, проведении исследования на устаревшем оборудовании или нарушении технологии тестирования. Иногда точность метода исследования предполагает определенный процент ошибки. Ложноотрицательный ответ возможен при тестировании на слишком ранней стадии заболевания, когда антитела еще не начали вырабатываться в нужном количестве, ложноположительный – на последней стадии острого гепатита, в период выздоровления.

Стоимость анализа

В государственных клиниках по направлению врача можно сдать анализ на гепатит бесплатно. Исследование на платной основе проводится в большинстве крупных городов страны. Цена зависит от конкретной лаборатории, используемого оборудования, сроков проведения, типа теста, региона и ряда других факторов.

Качественный тест на антитела к РНК- и ДНК-вирусу можно сделать в Москве и Санкт-Петербурге по цене 550–900 рублей. Стоимость количественного исследования варьируется в пределах 1200–10 000 рублей в зависимости от конкретного антигена, метода исследования, класса медицинского оборудования. Например, оценка вирусной нагрузки с детекцией в режиме реального времени, необходимая для определения эффективности лечения гепатита С, обойдется в 17 000–22 000 рублей. Выявление антигенов качественным методом в таких городах, как Новосибирск, Мурманск, Кострома, Махачкала, Симферополь будет стоить 300–800 рублей.

Сдача анализа на гепатит позволяет оперативно выявить заболевание и начать его лечение. А своевременно проведенная терапия в большинстве случаев обеспечивает полное выздоровление пациента или подавление активности вируса. Одним из главных способов профилактики гепатита B (наряду с соблюдением правил гигиены, а также с избеганием беспорядочных половых связей и отказом от приема наркотиков) является вакцинация. Ее обязательно нужно проводить тем, кто находится на гемодиализе, часто меняет сексуальных партнеров, работает с кровью или проживает в одной квартире с лицами, страдающими хронической формой болезни. Самые эффективные вакцины – отечественные. Они прицельно рассчитаны на те штаммы (генотипы) вируса, которые преобладают в нашей стране. Кроме того, современные российские вакцины производят без консерванта, в основе которого содержится ртуть.

Если кли­ни­чес­кие симп­то­мы ука­зы­ва­ют на функ­ци­о­наль­ные на­ру­ше­ния пе­че­ни, но ис­сле­до­ва­ние сы­во­рот­ки кро­ви на ви­рус­ные ге­па­ти­ты да­ло от­ри­ца­тель­ный ре­зуль­тат, до­пол­ни­тель­но сле­ду­ет прой­ти УЗИ пе­че­ни и жел­че­вы­во­дя­щих пу­тей, а так­же сдать ана­ли­зы на внут­рик­ле­точ­ные фер­мен­ты АлАт и АсАт. Вы долж­ны ис­клю­чить не толь­ко ин­фек­ци­он­ную, но ме­ха­ни­чес­кую при­ро­ду по­вреж­де­ния пе­че­ни, на­при­мер, ге­па­то­зы раз­лич­ной этио­ло­гии.

Ссылка на основную публикацию
Adblock
detector